Nhuộm đơn giản là gì? Các tính năng hàng đầu



các nhuộm đơn giản là một quy trình nhuộm nhanh chóng và đơn giản trong đó một loại thuốc nhuộm được sử dụng, đó là lý do tại sao nó được gọi là đơn giản. Nó chủ yếu được sử dụng để xác định hình thái và tổ chức của các tế bào có trong một mẫu.

Đương nhiên các tế bào không có màu sắc, vì vậy cần phải làm cho chúng có thể nhìn thấy theo một cách nào đó khi chúng được quan sát trong kính hiển vi.

Điều quan trọng là phải nhấn mạnh rằng các thuốc nhuộm được sử dụng trong nhuộm đơn giản phải là cơ bản với điện tích dương (cationic), để chúng có thể tự liên kết với thành tế bào và tế bào chất.

Những cấu trúc tế bào được tích điện âm. Đây là lý do tại sao thuốc nhuộm, tích điện dương, bị thu hút vào các tế bào và liên kết với chúng một cách tự nhiên. Do đó, tất cả các tế bào có trong một mẫu được tô màu nhanh chóng.

Thuốc nhuộm được sử dụng trong nhuộm đơn giản

Có một số thuốc nhuộm cơ bản có thể được sử dụng trong phòng thí nghiệm vi sinh. Được sử dụng nhiều nhất là:

- Xanh methylen.

- Pha lê tím.

- Malachite xanh.

- Fuchsin cơ bản.

Tất cả các thuốc nhuộm này hoạt động tốt ở vi khuẩn vì chúng có các ion màu (cation) tích điện dương (chromophores).

Thời gian nhuộm cho hầu hết các thuốc nhuộm này là tương đối ngắn. Chúng thường dao động từ 30 giây đến 2 phút, tùy thuộc vào ái lực của thuốc nhuộm.

Điều quan trọng là phải nhớ rằng trước khi nhuộm một mẫu bằng cách nhuộm đơn giản, nó phải được mở rộng và cố định vào phiến kính (máng trượt); Mẫu mở rộng và cố định được gọi là phết.

6 bước để thực hiện nhuộm đơn giản

Bước 1

Đặt slide trên giá nhuộm màu và áp dụng thuốc nhuộm mong muốn. Để lại thời gian tương ứng.

Thông thường, nhuộm đơn giản mất vài giây hoặc vài phút, tùy thuộc vào màu được sử dụng.

Quan sát

Trong bước này, điều quan trọng là không vượt quá thời gian được đề nghị cho thuốc nhuộm được sử dụng, vì các tinh thể có thể hình thành trên tấm, tạo ra cái gọi là "tạo tác" làm biến dạng hình thái của các tế bào.

Bước 2

Cẩn thận rửa vết bẩn của slide bằng nước cất từ ​​chai, hoặc cũng bằng nước máy chảy chậm, cho đến khi dòng chảy trở nên trong suốt. Điều này thường mất 5 đến 10 giây.

Quan sát

Không áp dụng dòng nước trực tiếp trên vết bẩn, để ngăn chặn lực tương tự làm hỏng mẫu.

Nếu bạn không có nước cất, bạn có thể sử dụng nước máy mà không gặp vấn đề gì vì nó sẽ không ảnh hưởng đến kết quả nhuộm màu.

Bước 3

Lau khô slide bằng khăn giấy thấm theo một hướng và không chà xát. Đảm bảo đáy của slide sạch sẽ.

Bước 4

Quan sát vết bẩn màu trong kính hiển vi. Bắt đầu với các mục tiêu xa nhất để định vị chính xác khu vực mà bạn muốn quan sát chi tiết hơn. Thay đổi mục tiêu để đến gần hơn và gần hơn với mẫu.

Quan sát

Để sử dụng ống kính có độ phóng đại cao nhất (thường là 100X), nên sử dụng dầu ngâm, vì nó giúp ánh sáng xuyên qua tốt hơn và hình ảnh sắc nét hơn. Không cần thiết phải sử dụng bao phủ.

Bước 5

Cuối cùng, loại bỏ tất cả các mẫu trong một thùng chứa thích hợp được dán nhãn đúng là "biohazard".

Tài liệu tham khảo

  1. (2001). Ứng dụng vi sinh: Hướng dẫn thí nghiệm vi sinh tổng quát (8 thứ chủ biên.) Các công ty McGraw-Hill.
  2. Harisha, S. (2006). Giới thiệu về công nghệ sinh học thực tế (1thứ). Tường lửa truyền thông.
  3. Moyes, R. B., Reynold, J., & Breakwell, D. P. (2009). Sơ bộ nhuộm vi khuẩn: Vết bẩn đơn giản. Các giao thức hiện tại về Vi sinh vật, (CUNG CẤP 15), 1-5.
  4. Pommerville, J. (2013). Phòng thí nghiệm vi sinh cơ bản của Alcamo (10thứ). Học tập của Jones & Bartlett.
  5. Prescott, H. (2002). Bài tập thí nghiệm vi sinh (5 thứ). Các công ty McGraw-Hill.
  6. Sumbali, G. & Mehrotra, R. (2009). Nguyên tắc vi sinh (1thứ). Giáo dục Tata McGraw-Hill.