MacConkey Agar nền tảng, chuẩn bị và sử dụng



các Thạch MacConkey Nó là một môi trường nuôi cấy rắn cho phép phân lập độc quyền trực khuẩn Gram âm. Vì lý do này, nó là một môi trường chọn lọc và cũng cho phép phân biệt giữa trực khuẩn lên men và không lên men của đường sữa, làm cho nó trở thành một môi trường khác biệt. Đây là một trong những môi trường nuôi cấy được sử dụng rộng rãi nhất trong phòng thí nghiệm vi sinh.

Môi trường này được sử dụng chủ yếu để phân lập trực khuẩn Gram âm thuộc họ. Enterobacteriaceae, bao gồm các loài cơ hội và enteropathogen.

Nó cũng có thể được sử dụng để phân lập các trực khuẩn đường ruột khác sống trong đường tiêu hóa, nhưng không thuộc về Enterobacteriaceae, như Aeromonas sp, Plesiomonas sp, trong số những người khác.

Cuối cùng, nó có thể phân lập các trực khuẩn glucose không lên men gram âm khác được tìm thấy trong môi trường, nước hoặc đất, nhưng đôi khi có thể là mầm bệnh cơ hội như Pseudomonas sp, Acinetobacter sp, kiềm kiềm, Chromobacterium violaceum, Stenotrophomonas maltophilia, trong số những người khác.

Chỉ số

  • 1 nền tảng
    • 1.1 MacConkey Agar
  • Chuẩn bị 2
  • 3 Công dụng của MacConkey agar thông thường
  • 4 biến thể khác của MacConkey agar
    • 4.1 MacConkey agar với sorbitol
    • 4.2 MacConkey Agar không có pha lê tím hoặc muối
    • 4.3 MacConkey agar với cefoperazon
    • 4.4 MacConkey Agar được pha chế với 10% nước biển v / v
  • 5 tài liệu tham khảo

Nền tảng

MacConkey Agar

Nền tảng của phương tiện này có thể được giải thích thông qua mô tả các thành phần của nó, bởi vì mỗi người có một mục đích xác định một thuộc tính của nó.

Muối mật và tinh thể tím

Theo nghĩa này, MacConkey agar có thành phần phức tạp. Trước hết nó chứa muối mật và tinh thể tím.

Những yếu tố này chịu trách nhiệm ức chế sự phát triển của vi khuẩn gram dương và một số trực khuẩn Gram âm đòi hỏi. Đổi lại, nó ủng hộ sự phát triển của trực khuẩn Gram âm mà không bị ảnh hưởng bởi các chất này. Đó là lý do tại sao nó là một phương tiện chọn lọc.

Nó được cho là hơi chọn lọc so với các phương tiện khác cũng ức chế sự phát triển của vi khuẩn gram dương và hầu hết các vi khuẩn gram âm.

Nó cực kỳ chọn lọc cho một chi cụ thể, chẳng hạn như môi trường thạch TCBS để phân lập Vibrio cholerae và các loài halophilic và kiềm tương tự khác.

Pepton, polypectone và đường sữa

Chứa các chất cung cấp các chất dinh dưỡng cần thiết cho các vi sinh vật phát triển trong môi trường này, chẳng hạn như pepton, polypectone và lactose.

Lactose là điểm mấu chốt để môi trường trở thành môi trường khác biệt, bởi vì các vi sinh vật có khả năng lên men đường sữa sẽ phát triển các khuẩn lạc màu hồng mạnh.

Một số vi khuẩn có thể lên men đường sữa chậm hoặc yếu, phát triển các khuẩn lạc màu hồng nhạt và vẫn còn đường sữa dương tính.

Những người không lên men đường sữa sử dụng pepton như một nguồn năng lượng, sản xuất amoniac, kiềm hóa môi trường. Do đó, các khuẩn lạc có nguồn gốc là không màu hoặc trong suốt.

Chỉ số PH

Sự thay đổi màu sắc đạt được thông qua một hợp chất thiết yếu khác có agar MacConkey. Hợp chất này là chỉ số pH, trong trường hợp này là màu đỏ trung tính.

Quá trình lên men của đường sữa tạo ra việc sản xuất axit hỗn hợp. Chúng axit hóa môi trường ở độ pH dưới 6,8..

Điều này làm cho chỉ báo pH chuyển sang màu hồng đậm. Cường độ của màu có thể thay đổi tùy theo độ pH cuối cùng.

Nước cất, natri clorua và agar

Mặt khác, nó chứa nước cất và natri clorua tạo ra sự cân bằng hydrat hóa và thẩm thấu cho môi trường. Cuối cùng, môi trường chứa agar, là cơ sở cung cấp tính nhất quán của môi trường rắn.

Môi trường thạch MacConkey đã chuẩn bị phải có pH cuối cùng được điều chỉnh thành 7.1 ± 0.2..

Chuẩn bị

Đối với một lít môi trường MacConkey, cần cân 50 g môi trường khử nước, sau đó đặt vào một ống khói và hòa tan trong một lít nước cất. Sau 10 phút nghỉ ngơi, nó được làm nóng bằng cách trộn liên tục cho đến khi sôi trong 1 phút.

Sau đó đặt ống khói vào nồi hấp và khử trùng ở 121 ° C trong 20 phút. Vào cuối thời gian, nó được lấy ra khỏi nồi hấp và để nguội đến nhiệt độ 45 ° C, sau đó được phục vụ trong các đĩa petri vô trùng bên trong tủ hút dòng chảy hoặc trước lò đốt Bunsen..

Cho phép hóa rắn và bảo quản trong giá đỡ đĩa đảo ngược và làm lạnh ở 2-8 ° C cho đến khi sử dụng.

Để có được một loại thạch MacConkey có tác dụng ức chế hiệu ứng tạo bọt do chi Proteus tạo ra, một loại thạch MacConkey có lượng muối thấp được sử dụng..

Công dụng của MacConkey agar thông thường

Môi trường thạch MacConkey được bao gồm trong tất cả các môi trường nuôi cấy được sắp xếp để gieo các mẫu lâm sàng nhận được trong phòng thí nghiệm. Nó cũng hữu ích trong vi sinh thực phẩm và vi sinh vật môi trường.

Sự đa dạng của trực khuẩn Gram âm phát triển trong môi trường này thể hiện các đặc điểm kiểu hình giúp chẩn đoán các loài được cho là có vấn đề. Ví dụ, kích thước, màu sắc, tính nhất quán và mùi của các thuộc địa là một số đặc điểm có thể hướng dẫn.

Trong môi trường này, loài Escherichia coli, Klebsiella sp và Vi khuẩn Enterobacter tạo ra các khuẩn lạc màu hồng mạnh, bao quanh là một khu vực mật kết tủa.

Càng nhiều, vi khuẩn càng Citrobacter sp, Providencia sp, Serratia sp và Hafnia sp chúng có thể xuất hiện mà không có màu sau 24 giờ hoặc hồng nhạt trong 24 -48 giờ.

Tương tự như vậy, các chi Proteus, Edwadsiella, Salmonella và Shigella tạo ra các khuẩn lạc không màu hoặc trong suốt.

Các biến thể khác của MacConkey agar

Có các biến thể khác của MacConkey agar có mục đích cụ thể. Tiếp theo họ được đề cập:

Thạch MacConkey với sorbitol

Phương tiện này được thiết kế để phân biệt chủng gây bệnh đường ruột (Escherichia coli enterohemorrhagic O157: H7) của phần còn lại của các chủng Escherichia coli.

Phương tiện này thay đổi đường carbohydrate cho sorbitol. Các chủng E.coli enterohaemorrhagic O157: H7 khác với phần còn lại vì chúng không lên men sorbitol và do đó thu được các khuẩn lạc trong suốt, tuy nhiên phần còn lại của các chủng E.coli Nếu chúng lên men sorbitol và các khuẩn lạc có màu hồng mạnh.

MacConkey Agar không có pha lê tím hoặc muối

Môi trường thạch này khác rất nhiều so với thạch MacConkey cổ điển, vì nó không có tinh thể tím, vi khuẩn gram dương có thể phát triển.

Mặt khác, sự vắng mặt của muối làm ức chế sự xuất hiện của môi trường thạch được sản xuất bởi một số trực khuẩn đường ruột, chẳng hạn như các chi của Proteus, và do đó tạo điều kiện cho sự phân lập của tất cả các vi khuẩn có mặt, bao gồm cả vi khuẩn gram dương.

Thạch MacConkey với cefoperazon

Biến thể MacConkey này được thiết kế để cô lập ban đầu Ấu trùng và sau đó họ nhận ra rằng nó rất hữu ích cho việc cô lập Arcobacter butzleri. MộtCả hai đều là trực khuẩn Gram âm hơi cong kháng với cefoperazon.

Những vi khuẩn này gần đây đã được liên kết là nguyên nhân gây viêm dạ dày ruột và tiêu chảy mắc phải ở các cá nhân châu Á và châu Âu, nổi lên như hai mầm bệnh mới nổi mạnh.

Loại kháng sinh này cho phép ức chế hệ thực vật đi kèm của đường tiêu hóa, tạo điều kiện cho sự phát triển của các vi khuẩn này, ngăn chúng không được chú ý, vì chúng cần 72 giờ để phát triển.

MacConkey Agar được chuẩn bị với 10% nước biển v / v

Biến thể này rất hữu ích cho việc đánh giá các chỉ số sức khỏe của vi khuẩn về ô nhiễm phân, bao gồm cả coliforms và coliforms phân trong nước mặn giải trí (bãi biển và vịnh).

Cortez và cộng sự 2013 đã chỉ ra rằng môi trường được điều chế theo cách này làm tăng đáng kể sự phục hồi của các vi sinh vật này trong môi trường nước mặn, so với việc sử dụng môi trường thạch MacConkey được điều chế bằng nước cất..

Điều này là do môi trường biến đổi kích thích sự phát triển của vi khuẩn sinh lý trong trạng thái ngủ đông "khả thi nhưng không thể trồng trọt", do đó chúng không thể phục hồi được trong môi trường thông thường.

Tài liệu tham khảo

  1. Lau SK, Woo PC, Hui WT, et al. Sử dụng cefoperazone MacConkey agar để phân lập chọn lọc Ấu trùng. J Micro Microbiol. 2003; 41 (10): 4839-41.
  2. "MacConkey Agar." Wikipedia, bách khoa toàn thư miễn phí. 4 tháng 4 năm 2018, 18h16 UTC. 29 tháng 12 năm 2018, 15:22 vi.wikipedia.org
  3. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Chẩn đoán vi sinh của Bailey & Scott. 12 ed. Argentina Panamericana S.A Biên tập.
  4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Chẩn đoán vi sinh. (Tái bản lần thứ 5). Argentina, Biên tập Panamericana S.A..
  5. Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Valbuena O. Ảnh hưởng của môi trường nuôi cấy được chuẩn bị bằng nước biển đến các chỉ số sức khỏe ở vùng biển Chichiriviche spa, bang Falcón, Venezuela. Rev Soc Come Microbiol 2013; 33: 122-128
  6. García P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). Thực hành vi sinh lâm sàng. Đại học Cadiz, tái bản lần thứ 2. Dịch vụ xuất bản UCA.