Nền tảng dinh dưỡng, chuẩn bị và sử dụng



các thạch dinh dưỡng nó là một môi trường nuôi cấy rắn không chọn lọc và không phân biệt. Trong môi trường này phát triển tất cả các loại vi khuẩn không đòi hỏi từ quan điểm dinh dưỡng.

Nó là một phương tiện đơn giản và, mặc dù tên của nó, chứa giá trị dinh dưỡng thấp hơn so với các phương tiện tương tự khác, chẳng hạn như agar não truyền dịch hoặc agar đậu nành trypticase.

Tính hữu dụng của nó trong phòng thí nghiệm rất đa dạng. Chủ yếu được sử dụng cho việc nuôi cấy các loài, duy trì các chủng, đếm các khuẩn lạc, làm cơ sở để chuẩn bị agar máu, trong số những người khác.

Tương tự như vậy, do màu be nhạt của nó, việc sản xuất các sắc tố được tạo ra bởi một số chủng vi khuẩn, chẳng hạn như sắc tố màu xanh lục của Pseudomonas aeruginosa, các sắc tố màu đỏ gạch được sản xuất bởi Serratia marcescens ở nhiệt độ phòng, sắc tố vàng vàng của Staphylococcus aureus, trong số những người khác.

Ngoài ra, nó là một trong những phương tiện truyền thông phát triển kinh tế nhất được tìm thấy trên thị trường.

Chỉ số

  • 1 nền tảng
  • 2 Thành phần
  • 3 Chuẩn bị
  • 4 công dụng
    • 4.1 Làm cơ sở cho việc chuẩn bị thạch máu
    • 4.2 Kích thích bào tử của vi khuẩn hình thành bào tử
    • 4.3 Bảo trì lọc
    • 4.4 Thuộc tính đếm
    • 4.5 Thực hiện các xét nghiệm chẩn đoán
    • 4.6 Phục hồi nước mặn giải trí hiếu khí hiếu khí (Bãi biển)
  • 5 tài liệu tham khảo

Nền tảng

Như đã đề cập, đó là một phương tiện rất đơn giản dựa trên việc cung cấp các chất dinh dưỡng cho sự phát triển của vi khuẩn mà không bị hạn chế và không có các phản ứng phức tạp để giải thích.

Vì môi trường trong mờ, lý tưởng cho việc đếm các khuẩn lạc bằng phương pháp gieo theo độ sâu.

Thành phần

Nó chủ yếu bao gồm chiết xuất thịt hoặc chiết xuất men, pepton hoặc tiêu hóa gelatin tụy, agar-agar, natri clorua và nước cất.

Chiết xuất của thịt hoặc nấm men và pepton đại diện cho các nguồn carbon và khoáng chất thiết yếu (nitơ, phốt pho và lưu huỳnh), sẽ được vi khuẩn sử dụng như một nguồn năng lượng và các yếu tố tăng trưởng.

Tương tự như vậy, agar-agar là cơ sở của tất cả các môi trường phát triển rắn, thay thế gelatin, là hợp chất cơ bản đầu tiên được sử dụng bởi Robert Koch để tạo sự nhất quán cho phương tiện truyền thông của ông..

Agar là một polysacarit bao gồm galactose, galactomannan, agarose và agaropectin. Nó đặt ở 40 ° C và tan chảy gần 100 ° C.

Về phần mình, natri clorua cung cấp cho môi trường tính thẩm thấu cần thiết cho sự phát triển của vi khuẩn.

Cuối cùng, nước phục vụ để hydrat hóa và hòa tan các hợp chất đông khô. Nên sử dụng nước cất điều chỉnh độ pH trung tính. Không nên sử dụng nước máy vì nó chứa canxi và magiê có thể phản ứng với phốt phát trong môi trường và tạo thành muối không hòa tan.

Chuẩn bị

Đối với một lít thạch dinh dưỡng, nên cân 31 g môi trường khử nước. Nó được đặt trong một fiola và hòa tan trong một lít nước cất. Sau 5 phút nghỉ ngơi, đun nóng trên một nguồn nhiệt và trộn liên tục cho đến khi nó sôi trong 1 hoặc 2 phút.

Sau đó đặt fiola vào nồi hấp và khử trùng ở 121 ° C trong 20 phút.

Vào cuối thời gian, nó được lấy ra khỏi nồi hấp và được phục vụ trong các đĩa petri vô trùng, sử dụng máy hút dòng chảy tầng hoặc đầu đốt Bunsen..

Nếu các đĩa Petri là loại dùng một lần (bằng nhựa), môi trường nên được phân phối khi môi trường thạch có nhiệt độ khoảng 50 ° C, để tránh bị biến dạng do nhiệt độ quá cao.

Cho phép hóa rắn và bảo quản trong giá đỡ đĩa đảo ngược và làm lạnh ở 2-8 ° C cho đến khi sử dụng.

Các tấm phải được tôi luyện trước khi gieo. Các tấm thạch nuôi dưỡng không nên được sử dụng nếu chúng bị ô nhiễm hoặc mất nước.

Độ pH của môi trường chuẩn bị nên được điều chỉnh thành 7,3 ± 0,2.

Công dụng

Đây là môi trường nuôi cấy đơn giản nhất được sử dụng trong phòng thí nghiệm vi sinh. Công thức của nó là tuyệt vời cho sự phát triển của vi khuẩn không đòi hỏi.

Công dụng chính của nó được giải thích dưới đây:

Làm cơ sở cho việc chuẩn bị thạch máu

Phương tiện này đôi khi được sử dụng làm cơ sở để chuẩn bị thạch máu, tuy nhiên nó không phải là cơ sở được sử dụng phổ biến nhất.

Kích thích bào tử của vi khuẩn hình thành bào tử

Môi trường nuôi cấy này đặc biệt hữu ích cho việc kích thích bào tử của vi khuẩn hình thành bào tử như Bacillus sp.

Để làm điều này, một chủng của chi được gieo Bacillus và được ủ trong 24 giờ ở 37 ° C trong thể dục nhịp điệu. Khi các khuẩn lạc được phát triển, tấm chịu áp lực bởi nhiệt độ, nghĩa là, nhiệt độ của bếp được tăng lên 44 ° C và để trong 24 giờ nữa hoặc được đưa vào tủ lạnh trong 24 giờ.

Vào cuối vụ, các nền văn hóa được mở rộng và nhuộm màu bằng nhuộm Gram hoặc nhuộm bào tử Shaeffer-Fulton. Trong đó, trực khuẩn với endospores (bào tử bên trong trực khuẩn) và exospores (bào tử bên ngoài trực khuẩn) sẽ được quan sát..

Bảo trì căng thẳng

Một số phòng thí nghiệm nghiên cứu hoặc phòng thí nghiệm hỗ trợ giảng dạy đại học cần duy trì vi khuẩn quan trọng trên lâm sàng càng lâu càng tốt, để sử dụng ngân hàng vi khuẩn (vi khuẩn) cho công việc nghiên cứu hoặc chuẩn bị thực hành giảng dạy. Học sinh sẽ học cách thao tác và xác định các vi sinh vật này.

Agar dinh dưỡng, cũng như agar não truyền, có thể được sử dụng cho mục đích này. Môi trường thạch được chuẩn bị, đổ vào các ống có nắp bakelite và nghiêng trên đế, theo cách mà agar đông cứng tạo thành một khối ở đáy và vát trên bề mặt (đỉnh sáo).

Mỗi ống được dán nhãn bằng cách đặt tên của vi khuẩn sẽ được trồng và ngày. Trên khung, mỗi vi khuẩn sẽ được trồng và ủ trong 24 giờ, sau khi các khuẩn lạc được nuôi cấy, các ống được bảo quản ở nhiệt độ phòng.

Vi khuẩn phải được gia hạn từ 1 đến 3 tháng, để tránh ô nhiễm và mất nước của môi trường cũng như cái chết của vi khuẩn.

Chỉ những vi khuẩn không đòi hỏi có thể được duy trì theo cách này.

Thuộc địa đếm

Mặc dù có các phương tiện chuyên dụng để đếm các khuẩn lạc, như agar đếm tiêu chuẩn, agar dinh dưỡng có thể được sử dụng cho mục đích này, bằng cách gieo trên bề mặt bằng thìa drigalski hoặc theo độ sâu. Do đó, nó rất hữu ích trong phân tích vi sinh thực phẩm và nước.

Thực hiện các xét nghiệm chẩn đoán

Bởi vì nó là một phương tiện không chứa máu, hoặc bất kỳ chất phụ gia nào khác, lý tưởng là lấy các khuẩn lạc được trồng trong môi trường này để thực hiện xét nghiệm catalase.

Tương tự như vậy, do màu sắc rõ ràng của nó, nó được chỉ định để thực hiện các xét nghiệm oxyase trực tiếp trên một khu vực của môi trường thạch, mà không bị nhiễu.

Phục hồi nước mặn giải trí hiếu khí (Bãi biển)

Agarent dinh dưỡng được chuẩn bị với 10% nước biển rất hữu ích cho việc đánh giá aerobes mesophilic trong nước biển.

Theo cách này, chúng ta có thể đánh giá mức độ ô nhiễm thực sự của nước với các vi sinh vật này, vì trong loại mẫu này, kết quả bị chồng chéo khi sử dụng môi trường nuôi cấy được chuẩn bị theo cách thông thường.

Điều này đã được chứng minh bởi Cortez et al. vào năm 2013 trong một bài nghiên cứu.

Điều này có thể giải thích được do sự thay đổi đột ngột mà vi khuẩn trải qua khi đi từ môi trường siêu mặn đến môi trường muối thấp, do đó các vi sinh vật rơi vào trạng thái lờ đờ trong đó chúng có thể sống được, nhưng không thể nuôi cấy được.

Tài liệu tham khảo

  1. "Thạch dinh dưỡng." Wikipedia, bách khoa toàn thư miễn phí. Ngày 13 tháng 9 năm 2016, 20:33 UTC. 29 tháng 12 năm 2018, 21:04 vi.wikipedia.org
  2. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Chẩn đoán vi sinh của Bailey & Scott. 12 ed. Argentina Panamericana S.A Biên tập.
  3. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Chẩn đoán vi sinh. (Tái bản lần thứ 5). Argentina, Biên tập Panamericana S.A..
  4. Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Valbuena O. Ảnh hưởng của môi trường nuôi cấy được chuẩn bị bằng nước biển đến các chỉ số sức khỏe ở vùng biển Chichiriviche spa, bang Falcón, Venezuela. Rev Soc Come Microbiol 2013; 33: 122-128
  5. Paredes V, Dias V, Silva de Almeida M và Cardoso M. Chất lượng vi sinh của nước để truyền liều, cho Suinos.Cient.AgroComaz. 2013; 1 (2): 42-49.
  6. García P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). Thực hành vi sinh lâm sàng. Đại học Cadiz, tái bản lần thứ 2. Dịch vụ xuất bản UCA.