Agar Salmonella-Shigella nền tảng, chuẩn bị và sử dụng



các Thạch Salmonella-Shigella còn được gọi là môi trường thạch SS, là môi trường chọn lọc và phân biệt vừa phải, được thiết kế đặc biệt để phân lập vi khuẩn gây bệnh đường ruột của Salmonella và Shigella, từ cả mẫu môi trường và lâm sàng..

Thạch SS có thành phần phức tạp; Nó bao gồm chiết xuất thịt, peptone, lactose, muối mật, natri citrat, natri thiosulfate, ferric citrate, agar, đỏ trung tính, xanh tươi và nước cất. Với tính chọn lọc tuyệt vời của nó, có thể trồng các mẫu với hệ thực vật hỗn hợp phong phú.

Trong các phòng thí nghiệm vi sinh, môi trường Salmonella-Shigella được sử dụng rộng rãi để điều tra sự hiện diện của Salmonella và Shigella trong các mẫu phân tiêu chảy, nước thải, nước uống và thực phẩm.

Đôi khi cần phải sử dụng nước dùng làm giàu trước (nước dùng đường sữa) và làm giàu (nước dùng selenite cystine) để phục hồi các chủng Salmonella.

Các bước này được yêu cầu khi sự tồn tại của Salmonella bị nghi ngờ với số lượng rất thấp hoặc trong trường hợp chủng có thể bị ngược đãi bởi các quy trình điển hình của sản xuất công nghiệp, chủ yếu là thực phẩm chế biến. Cũng nên làm giàu mẫu phân từ những bệnh nhân đã được điều trị bằng kháng sinh.

Sau đó, nước dùng được làm giàu có thể được gieo trên môi trường thạch Salmonella-Shigella và các phương tiện tương tự khác, như xylo agar, deoxysiloxane lysine (XLD) và thạch Hektoen (HE).

Chỉ số

  • 1 nền tảng
    • 1.1 Sức mạnh dinh dưỡng
    • 1.2 Tính nhất quán
    • 1.3 Chọn lọc
    • 1.4 vi sai
  • Chuẩn bị 2
  • 3 Sử dụng
  • 4 hạn chế
  • 5 Kiểm soát chất lượng
  • 6 tài liệu tham khảo

Nền tảng

Mỗi thành phần của môi trường nuôi cấy Salmonella-Shigella có một chức năng cụ thể và toàn bộ hỗn hợp mang lại cho nó các đặc tính đặc trưng cho nó.

Sức mạnh dinh dưỡng

Chiết xuất thịt và peptone (casein tiêu hóa và mô động vật) cung cấp các chất dinh dưỡng cần thiết (nitrogens, carbon và vitamin) để phát triển các vi sinh vật có khả năng dung nạp phần còn lại của các thành phần.

Kiên định

Agar-agar chịu trách nhiệm cung cấp sự nhất quán vững chắc cho phương tiện.

Chọn lọc

Phương tiện này có tính chọn lọc cao vì nó chứa muối mật, natri citrat và màu xanh lá cây tươi sáng. Do đó, nó ức chế sự phát triển của tất cả các vi khuẩn gram dương và hầu hết các trực khuẩn Gram âm, bao gồm một số coliforms.

Trong khi vi khuẩn thuộc chi Salmonella và một số chủng Shigella hỗ trợ các hợp chất này.

Chủ yếu, chi Salmonella có khả năng kháng muối mật rất nhiều, đến mức chúng có thể sống trong túi mật của một số bệnh nhân mang mầm bệnh liên tục tống xuất vi khuẩn qua phân.

Chênh lệch

Lactose là carbohydrate lên men giúp phân biệt các chủng lên men đường sữa với các chủng không lên men. Tính chất này được chứng minh bằng sự hiện diện của chất chỉ thị pH, trong môi trường này có màu đỏ phenol.

Các chủng lên men đường sữa cho các khuẩn lạc màu đỏ, trong khi các chủng không lên men là không màu. Đặc tính này rất quan trọng, vì Salmonella và Shigella không lên men đường sữa.

Mặt khác, môi trường này có chứa natri thiosulfate như một nguồn lưu huỳnh và ferric citrate như một nguồn sắt. Cả hai hợp chất có khả năng phân biệt vi khuẩn có khả năng sản xuất hydro sunfua. Những chất này phản ứng tạo thành kết tủa đen của sunfua sắt không hòa tan và nhìn thấy được.

Khách sạn này có một số chủng Salmonella. Thông thường các thuộc địa của chúng là phẳng không màu với một chấm đen ở trung tâm của nó. Phần còn lại của Salmonellas không tạo ra H2S và phát triển thành khuẩn lạc không màu.

Mặt khác, các khuẩn lạc của chi Shigella không phẳng mà không bị đen.

Chuẩn bị

Điều này có nghĩa là rất đơn giản để chuẩn bị.

Cân 63 gr môi trường thương mại khử nước và hòa tan trong một lít nước cất. Đun nóng dung dịch và khuấy. Hỗn hợp có thể đạt đến sôi trong vài phút.

Phương tiện này không nên hấp. Sau khi hòa tan, nó được phục vụ trực tiếp trên đĩa vô trùng đơn hoặc đôi.

Khi hóa rắn, chúng được sắp xếp theo cách đảo ngược trong các nhà sản xuất mảng bám và được bảo quản trong tủ lạnh (2-8 ° C) cho đến khi chúng được sử dụng.

Môi trường sau khi chuẩn bị nên có pH 7,2 ± 0,2 và đỏ cam.

Điều quan trọng là phải cho phép các tấm được tôi luyện trước khi gieo mẫu. Bạn có thể gieo trực tiếp mẫu ban đầu, thải nguyên liệu lên một phần của môi trường thạch và sau đó từ đó phù hợp với sự cạn kiệt.

Trong trường hợp sử dụng nước dùng được làm giàu, hãy chuyển một phần nước dùng selenite và gieo bằng thìa drigalski.

Ủ ở 37 ° C trong 24 giờ trong thể dục nhịp điệu.

Hãy nhớ rằng lượng gram cần cân và độ pH cuối cùng của môi trường có thể thay đổi từ nhà thương mại này sang nhà khác. Các tấm cơ sở của phương tiện luôn mang lại chỉ dẫn cho sự chuẩn bị của nó.

Sử dụng

Nó thường được sử dụng trong phân tích nuôi cấy phân và trong nghiên cứu vi sinh của các mẫu nước dư, nước uống và thực phẩm.

Thông thường các đĩa đôi được chuẩn bị, một mặt thạch Salmonella-Shigella được đặt và mặt khác là thạch XLD.

Hạn chế

-Một số chủng Shigella không phát triển trong môi trường này. Do đó, không nên phân lập chính của chi này.

-Không phải mọi thuộc địa rõ ràng với một trung tâm màu đen là dấu hiệu của Salmonella; Các xét nghiệm sinh hóa phải được thực hiện để xác định chính xác, vì các khuẩn lạc của một số chủng Proteus không thể phân biệt được với các chủng Salmonella.

-Môi trường mất nước nên cẩn thận khi tiếp xúc với môi trường, vì nó rất hút ẩm. Do đó, nó phải được giữ trong môi trường khô ráo và kín. Mở trong thời gian rất ngắn.

-Theo thời gian, muối mật trong môi trường có thể kết tủa, tạo thành một hình ảnh tương tự như bị mờ trong môi trường thạch, nhưng điều này không ảnh hưởng đến kết quả.

-Một số chủng Shigella có thể lên men từ từ đường sữa.

Kiểm soát chất lượng

Để chứng minh rằng môi trường hoạt động chính xác, nên trồng các chủng đối chứng đã biết hoặc đã được chứng nhận và quan sát xem sự tăng trưởng có đáp ứng các đặc điểm dự kiến ​​không.

Đối với mục đích này, chủng E. coli, Enterobacter sp, Klebsiella pneumoniae, Shigella flexneri, Salmonella typhimurium o Enterococcus faecalis.

Kết quả dự kiến ​​là:

Escherichia coli --khuẩn lạc lồi hồng.

Enterobacter và Klebsiella- khuẩn lạc lớn và chất nhầy màu đỏ hoặc hồng.

Shigella flexneri --khuẩn lạc phẳng hoặc không màu.

Salmonella typhimurium - khuẩn lạc không màu với trung tâm màu đen.

Enterococcus faecalis-- ức chế hoàn toàn.

Tài liệu tham khảo

  1. Phòng thí nghiệm Difco Francisco Soria Melguizo. Môi trường Salmonella-Shigella. 2009. Có sẵn tại: f-soria.es
  2. Phòng thí nghiệm BD. Agar Salmonella-Shigella. 2013. Có sẵn tại: bd.com
  3. Phòng thí nghiệm Britania. Agella Salmonella-Shigella. 2015. Có sẵn tại: britanialab.com
  4. Chẩn đoán Valtek. Agar Salmonella-Shigella (SS Agar) .2010. Có sẵn tại: andinamedica.com
  5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Chẩn đoán vi sinh của Bailey & Scott. 12 ed. Biên tập Panamericana S.A. Argentina.
  6. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Chẩn đoán vi sinh. Tái bản lần thứ 5 Biên tập Panamericana S.A. Argentina.