Các loại xét nghiệm sinh hóa, những gì họ đang làm và tầm quan trọng

các xét nghiệm sinh hóa trong vi sinh học, chúng là một tập hợp các xét nghiệm hóa học được thực hiện trên các vi sinh vật có trong mẫu để xác định chúng; Những vi sinh vật này thường là vi khuẩn. Có một số lượng lớn các xét nghiệm sinh hóa có sẵn cho một nhà vi trùng học.

Tuy nhiên, việc lựa chọn các xét nghiệm này dựa trên những phát hiện ban đầu, chẳng hạn như mẫu nhuộm Gram và các ký tự tăng trưởng, cho phép vi khuẩn được chỉ định vào một loại cụ thể. Các xét nghiệm sinh hóa chủ yếu dựa trên đặc tính trao đổi chất của từng loại vi khuẩn. 

Không phải tất cả các vi khuẩn đều có cùng đặc tính, vì vậy chúng được nghiên cứu nếu chúng có bất kỳ enzyme đặc biệt nào bằng cách thêm chất nền và chờ phản ứng xảy ra. Thông thường xác định này được đưa ra bởi sự thay đổi màu sắc hoặc độ pH trong môi trường nuôi cấy.

Ít hơn 15 xét nghiệm sinh hóa thường được yêu cầu để xác định vi khuẩn đáng tin cậy đến cấp loài. Thực hiện nhiều xét nghiệm sinh hóa có thể làm tăng sự tự tin trong nhận dạng.

Hầu hết các xét nghiệm sinh hóa này được thực hiện trong huyết thanh hoặc huyết tương. Tuy nhiên, chúng cũng có thể được thực hiện trong các dịch tiết sinh học khác như nước tiểu, dịch não tủy, dịch màng phổi và phân, trong số những người khác..

Chỉ số

• 1 Phân loại
  • 1.1 Phổ quát
  • 1.2 vi sai
  • 1.3 Cụ thể
• 2 loại xét nghiệm sinh hóa
  • 2.1 Thử nghiệm catalase
  • 2.2 Thử nghiệm oxyase
  • 2.3 Thử nghiệm Agar Mannitol muối (MSA)
  • 2.4 Thử nghiệm Coagulase
  • 2.5 Thử nghiệm urease
• 3 Các xét nghiệm sinh hóa để làm gì??
• 4 Tầm quan trọng
• 5 tài liệu tham khảo

Phân loại

Các xét nghiệm sinh hóa có thể được phân thành 3 nhóm:

Phổ cập

Đây là những xét nghiệm có thể được thực hiện trên bất kỳ mẫu nào và hướng dẫn nhà vi trùng học về các xét nghiệm sinh hóa sau đây phải được thực hiện để có được nhận dạng đáng tin cậy..

Ví dụ

Thử nghiệm catalase và oxyase.

Sự khác biệt

Đây là các thử nghiệm được thực hiện để xác định các vi sinh vật có trong mẫu cho đến cấp loài.

Việc xác định được thực hiện dựa trên kết quả của sự kết hợp các xét nghiệm, vì các kết quả riêng lẻ không đủ thông tin để thực hiện nhận dạng.

Ví dụ

Thử nghiệm IMViC và thử nghiệm sử dụng đường.

Cụ thể

Chúng là các thử nghiệm cụ thể cho một tập hợp các loài cụ thể hoặc để phân nhóm một loài. Các xét nghiệm này thường được thực hiện để xác nhận hoặc xác định ở cấp phân loài. Các bài kiểm tra cá nhân là thông tin của chính họ.

Ví dụ

Xét nghiệm-Glutamyl aminopeptidase.

Các loại xét nghiệm sinh hóa

Thử nghiệm catalase

Thử nghiệm catalase là một thử nghiệm để chứng minh sự hiện diện của enzyme catalase bằng cách phân hủy hydro peroxide thành oxy và nước. Một lượng nhỏ vi khuẩn được thêm vào một giọt hydro peroxide (3%) trên slide.

Thử nghiệm catalase là một thử nghiệm đơn giản được các nhà vi trùng học sử dụng để giúp xác định các loài vi khuẩn và xác định khả năng của một số vi khuẩn phân hủy hydro peroxide bằng cách sản xuất enzyme catalase.

Nếu quan sát thấy bong bóng oxy, điều đó có nghĩa là vi khuẩn sở hữu enzyme catalase, vì nó xúc tác sự phân hủy hydro peroxide thành oxy và nước. Người ta nói rằng sinh vật là catalase dương tính (ví dụ: Staphylococcus aureus).

Xét nghiệm oxyase

Thử nghiệm này được sử dụng để xác định các vi sinh vật có chứa enzyme cytochrom oxydase (quan trọng trong chuỗi vận chuyển điện tử). Nó thường được sử dụng để phân biệt giữa các họ Enterobacteriaceae và Pseudomadaceae.

Cytochrom oxydase chuyển các electron từ chuỗi vận chuyển điện tử sang oxy (chất nhận điện tử cuối cùng) và khử nó thành nước. Các xét nghiệm Oxidase cung cấp các phân tử chấp nhận và cho điện tử nhân tạo.

Khi người cho điện tử bị oxy hóa do tác động của cytochrom oxydase, môi trường trở thành màu tím đậm và được coi là kết quả dương tính. Các vi sinh vật Pseudomonas aeruginosa là một ví dụ về vi khuẩn oxyase dương.

Thử nghiệm muối Mannitol (MSA)

Loại thử nghiệm này là cả chọn lọc và khác biệt. MSA sẽ chọn các sinh vật có khả năng sống trong môi trường có nồng độ muối cao, chẳng hạn như các loài Tụ cầu khuẩn trái ngược với các loài Liên cầu khuẩn, tăng trưởng bị ức chế trong những điều kiện này.

Thành phần khác biệt trong xét nghiệm này là đường mannitol. Các sinh vật có khả năng sử dụng mannitol làm nguồn thức ăn sẽ tạo ra các sản phẩm phụ của quá trình lên men, có tính axit và do đó, sẽ làm giảm độ pH của môi trường.

Độ axit của môi trường làm cho chỉ thị pH, phenol đỏ, chuyển sang màu vàng. Ví dụ về các loài vi khuẩn có thể được phân biệt bằng phương pháp này là: Staphylococcus aureus (tích cực vì nó lên men mannitol) và Staphylococcus biểu bì (tiêu cực vì mannitol không lên men).

Xét nghiệm Coagulase

Coagulase là một enzyme giúp đông máu huyết tương. Xét nghiệm này được thực hiện trên vi khuẩn gram dương và catalase dương tính để xác định Staphylococcus aureus (coagulase dương tính) Trên thực tế, coagulase là yếu tố độc lực của loài vi khuẩn này.

Sự hình thành cục máu đông xung quanh nhiễm trùng do vi khuẩn này có thể bảo vệ nó khỏi thực bào. Bài kiểm tra này rất hữu ích khi bạn muốn phân biệt giữa Staphylococcus aureus của các loài khác của Tụ cầu khuẩn coagulase âm tính.

Xét nghiệm urease

Thử nghiệm này được sử dụng để xác định vi khuẩn có khả năng thủy phân urê, sử dụng enzyme urease. Nó thường được sử dụng để phân biệt giới tính Proteus vi khuẩn đường ruột khác.

Sự thủy phân urê tạo ra amoniac là một trong những sản phẩm của nó. Cơ sở yếu này làm tăng độ pH của môi trường trên 8.4 và chỉ số pH (đỏ phenol) chuyển từ vàng sang hồng. Một ví dụ về vi khuẩn urease dương tính là Proteus mirabilis.

Các xét nghiệm sinh hóa để làm gì??

Các xét nghiệm sinh hóa trong vi sinh được sử dụng để chẩn đoán các bệnh do vi khuẩn gây ra và theo dõi các phương pháp điều trị được sử dụng để chống lại chúng. Ngoài ra, chúng được sử dụng để sàng lọc các bệnh truyền nhiễm và tiên lượng của chúng..

Việc xác định sinh hóa của vi sinh vật cung cấp một ý tưởng về những gì các vi sinh vật này có khả năng làm, có thể phân biệt các chủng khác nhau của cùng một loài bằng các hồ sơ sinh hóa cụ thể.

Sự khác biệt trong các hoạt động enzyme cụ thể thông báo về sinh thái, sinh lý hoặc môi trường sống tự nhiên của vi sinh vật, trong một số trường hợp có thể được coi là thông tin quan trọng.

Ý nghĩa

Sự khác biệt về cấu trúc liên quan đến hình dạng, kích thước và cách xử lý của vi khuẩn giúp ích rất ít trong quá trình xác định, bởi vì có nhiều loài vi khuẩn có hình dạng, kích thước và cách xử lý tương tự.

Vì lý do này, cuối cùng việc xác định vi khuẩn chủ yếu dựa trên sự khác biệt trong các hoạt động sinh hóa của chúng.

Mỗi loài vi khuẩn có một tập hợp các hoạt động trao đổi chất được xác định rõ ràng khác với tất cả các loài khác. Những "dấu vân tay" sinh hóa này là những đặc tính được kiểm soát bởi các enzyme của vi khuẩn.

Do đó, các xét nghiệm sinh hóa rất quan trọng vì chúng giúp nhà nghiên cứu xác định chính xác các mầm bệnh có trong mẫu và, theo cách này, để có thể đề xuất phương pháp điều trị thích hợp cho bệnh nhân..

Tài liệu tham khảo

1. Beckett, G., Walker, S. & Rae, P. (2010). Sinh hóa lâm sàng (Tái bản lần thứ 8). Wiley-Blackwell.
2. Clarke, P. H., & Cowan, S. T. (1952). Phương pháp sinh hóa cho vi khuẩn học. Tạp chí Vi sinh vật học đại cương, 6(1952), 187-197.
3. Gaw, A., Murphy, M., Srivastava, R., Cowan, R., St, D. & O'Reilly, J. (2013). Sinh hóa lâm sàng (Tái bản lần thứ 5). Khoa học sức khỏe Elsevier.
4. Goldman, E. & Green, L. (2008). Cẩm nang thực hành vi sinh (Tái bản lần 2). Báo chí CRC.
5. Mitchigan, W. (1998). Phương pháp thí nghiệm vi sinh thực phẩm (Tái bản lần thứ 3). Báo chí học thuật.
6. Vasanthakumari, R. (2009). Vi sinh thực hành. Ấn phẩm BI.